目的:探索建立一种快速检测眼部常见真菌对抗真菌药物敏感性的新方法。方法:对24株镰刀菌(1株实验室菌株和23株临床菌株)分别进行标准药敏试验和FCM药敏试验(FCST)双盲检测。FCST法:生理盐水制备各株真菌的孢子悬液,用分光光度计调整孢子浓度至1-6×106Cell/ml;取 200微升菌悬液与等体积两性霉素(AMB) 、氟康唑(FCZ)混合后35°C孵育3小时(AMB)或5小时(FCZ),取上述孵育液0.2ml加入0.1%脱氧胆酸钠0.2 ml和10μl PI,混匀避光孵育1小时后上机检测。最低抑菌浓度(MIC)定义为:相于生长对照管平均荧光强度(MFI)增加50%时最低药物浓度。肉汤稀释法操作程序依照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的M38-A方案。对两种检测方法所获得的MIC数据进行配对t检验,比较两种方法所得结果的一致性。结果:真菌孢子的平均荧光强度值随着药物浓度的增加而增强,其变化具有浓度依赖性,较好地反映了药物的抗菌效应。FCST法测试两种药物敏感性分别只需4及6小时。AMB所测结果的两种方法的一致性达83.3%(1个稀释度范围)及91.6%(2个稀释度范围), FCZ两种方法的一致性达83.3% (1个稀释度范围)及100%(2个稀释度范围);配对t检验显示两者无显著性差异(AMB P=0.4129, FCZ P=0.2574)。结论: FCST法是一种可靠的快速的药敏试验方法,可用于检测镰刀菌对AMB及FCZ的药物敏感性,该法可在一个工作日获得药敏结果,有助于指导临床选择适当的抗真菌药物进行治疗。 |