| 目的：利用连锁分析方法对四个具有常染色体显性遗传特点的高度近视家系在MYP2基因内进行致病基因定位分析。方法：按照孟德尔遗传法则筛选出具有常染色体显性遗传特点的高度近视家系共四个（A、B、C、D），实验前常规行眼部裂隙灯和直接检眼镜检查，睫状肌麻痹后检影验光，IOLMaster检查眼轴长度（屈光介质浑浊者用A超测定）。采集四个家系所有成员外周血各5ml，酚氯法提取所有成员的DNA，紫外分光光度仪测定260nm、280nmDNA分光光度值（OD值），计算DNA含量及纯度。选取MYP2基因内微卫星标记D18s63，对微卫星标记进行PCR扩增，将PCR产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳，观察扩增效率；通过12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳确定等位基因分型。应用LINKAGE软件(version5.1)中的MLINK对微卫星D18s63与高度近视致病基因两点间进行连锁分析，计算LOD值。结果：家系A高度近视的致病基因与所选的微卫星D18s63经连锁分析后，最大LOD值为1.36；其他三个家系最大LOD值介于﹣2和﹢1之间。结论：家系A高度近视的致病基因与MYP2内D18s63连锁；而家系B、C、D则需要增大样品量进一步分析，以证实他们的致病基因与D18s63是否存在连锁关系。 |
