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tTG基因反义寡核苷酸的设计及其在体外培养牛眼小梁细胞内表达的变化         
tTG基因反义寡核苷酸的设计及其在体外培养牛眼小梁细胞内表达的变化
作者:胡义珍  … 文章来源:华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科 430022 点击数: 更新时间:2004-6-2
目的 探讨组织型谷氨酰胺转移酶(tTG)利用反义寡核苷酸介导技术在体外培养牛眼小梁细胞内表达的变化。方法 根据tTGmRNA序列的二级结构设计两条硫代修饰反义寡核苷酸序列,采用阳离子脂质体介导技术转染体外培养的牛眼小梁细胞,实验分为反义核苷酸A组,反义核苷酸B组和空白对照组。应用RT-PCR和免疫组化法检测tTG在转染前后表达的变化。结果 经脂质体介导的反义寡核苷酸A组,tTG在蛋白和mRNA水平均有显著下降(P<0.05),而反义寡核苷酸B组表达水平无明显下降(P>0.05)。结论 组织型谷氨酰胺转移酶(tTG)作为一种钙依赖性的多功能性蛋白质,可催化γ-谷氨酰胺与赖氨酸ε-氨基的共价交联或催化底物形成多聚体,在维持细胞外基质的稳定方面起着重要作用,可能是原发性开角型青光眼(POAG)的发病因素之一.本实验采用脂质体介导的硫代修饰反义寡核苷酸技术降低tTG在体外培养牛眼细胞内的表达,为治疗原发性开角型青光眼提供了新的思路.
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